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29 novembre 2023

Il valore clinico dei parametri ematologici di neutrofili e monociti nella diagnosi ed identificazione della sepsi

Sepsi

Introduzione

La sepsi è una condizione pericolosa per la vita dovuta al malfunzionamento degli organi causato da una risposta immunitaria disordinata dell’ospite all’infezione. Ogni anno, più di 19 milioni di persone soffrono di sepsi e 6 milioni muoiono. Con un tasso di mortalità superiore a 25, la sepsi mette seriamente in pericolo la salute umana . È un malattia progressiva, che avanza gradualmente dall’infezione locale a shock settico e la mortalità aumenta con il decorso della malattia.

L’analizzatore automatizzato per emocromo  BC-6800 Plus  (Mindray,  Shenzhen, Cina) utilizza  l’esclusiva tecnologia SF-Cube di rilevamento per ottenere il volume dei leucociti, la complessità cellulare, contenuto di acidi nucleici e altre informazioni caratteristiche che vengono automaticamente emesse come parametri di rilevamento quantitativi in grado di descrivere la morfologia , come NEU-X, NEU-Y, MON-X e MON-Y (NEU rappresenta i neutrofili; MON sta per monociti; X indica la posizione del baricentro del segnale luminoso a dispersione laterale e rappresenta il cellulare complessità; Y indica la posizione del baricentro del segnale laser a fluorescenza laterale e rappresenta il contenuto di acido nucleico nelle cellule). Tutti questi parametri possono riflettere vividamente i cambiamenti morfologici nelle cellule del sangue periferico.

Lo studio , si rimanda al link per la consultazione dell’articolo originale

http://www.medicalsystems.it/wp-content/uploads/2023/11/Sepsiatm-09-22-1680.pdf

ha avuto la finalità di investigare il potenziale valore  clinico di NEU-X, NEU-Y, MON-X e MON-Y, utilizzando il metodo statistico della curva ROC per definire la  migliore soglia diagnostica nella diagnosi di sepsi, e confrontare le loro prestazioni cliniche con la CRP. Inoltre,è stato eseguito l’esame microscopico dello striscio di sangue per confermare se i parametri ematologici possono veramente riflettere il cambiamento morfologico dei leucociti.

Nello studio sono stati esaminati  totale di 527 di campioni di sangue raccolti in EDTA-K2 provenienti da pazienti ricoverati al pronto soccorso, nel  dipartimento di medicina interna, nel reparto di malattie infettive e di unità di terapia intensiva (ICU) e fisica  dell’Ospedale del Terzo Popolo di Shenzhen da dicembre 2018 a giugno 2019. Tutti i test sono stati completati entro 6 ore dalla raccolta del campione.

I campioni sono stati retrospettivamente classificati in tre gruppi.

Il gruppo 1 consisteva in pazienti  normali sottoposti a un normale  controllo fisico. Individui senza segni o sintomi di infezione o infiammazione (n=260), inclusi 132 maschi e 128 femmine,di età compresa tra 19 e 72 anni con un’età media di 35,6 anni (SD=11,8).

Il gruppo 2 era costituito da pazienti con coltura positiva  a cui è stata diagnosticata un’infezione batterica (n = 196),inclusi 151 maschi e 45 femmine, di età compresa tra 20 e 94 anniun’età media di 55,5 anni (DS = 17,9).

Il gruppo 3 era composto di pazienti affetti da sepsi con risultati colturali positivi (n=71),inclusi 49 maschi e 22 femmine, di età compresa tra 20 e 89 anni con un’età media di 50,8 anni (SD =17,7).

I criteri per l’arruolamento dei pazienti con sepsi erano basati sulle definizioni del Terzo Consenso Internazionale per Sepsi e shock settico (Sepsis-3) pubblicato nel 2016 (12).

Valore clinico nella diagnosi di sepsi

E’stata eseguita l’analisi ROC ed è stata calcolata l’area sotto la curva ROC (AUC) per valutare le prestazioni di questi parametri nella diagnosi di sepsi. Il cut off  ottimale dei valori sono stati determinati in base all’indice di Youden (sensibilità + specificità − 1), quindi sono state calcolate  la sensibilità e la specificità . Come mostrato nella Figura 1F, NEU-X,EU-Y, MON-X, MON-Y e CRP hanno  dimostrato una buona utilità nella diagnosi di sepsi. Le AUC del 4 i parametri sono risultate rispettivamente 0,751, 0,877, 0,791 e 0,695,mentre l’AUC del CRP era 0,790. Quando i valori di cut off di NEU-X, NEU-Y, MON-X e MON-Y erano 350,3,457,8, 206,5 e 981,8, la sensibilità era del 74,6%, 87,3%, 77,6% e 71,6% e le specificità erano 58,2%,rispettivamente 72,1%, 65,9% e 51,4%.

Il valore clinico dello studio è stato potenziato da una analisi morfologica dei campioni

Al fine di confermare preliminarmente se NEU-X può riflettere veramente la granulazione tossica dei neutrofili,  campioni con 5 livelli differenti di NEU-X con i valori di 296,9, 351,2, 401,5, 447.3 e 504.5 sono stati selezionati per lo striscio di sangue microscopico . Le immagini della granulazione tossica dei neutrofili al microscopio sono mostrati nella Tabella 3. I risultati hanno  dimostrato che quando il valore NEU-X era 296,9, i granuli citoplasmatici dei neutrofili risultavano diminuiti. Quando il valore NEU-X era 351,2, la morfologia dei neutrofili era generalmente normale e granuli specifici dei neutrofili erano presenti nel citoplasma, ma non era presente alcuna granulazione tossica. Quando il valore NEU-X era 401,5, il numero di granulazioni citoplasmatiche era significativamente aumentato e il colore del citoplasma era più scuro a causa della presenza dei granuli, ma non sono stati osservati evidenti granuli tossici. Quando il valore di NEU-X era 447,3, il citoplasma era pieno di granulazioni di sostanze tossiche con conseguente coloro più scuro. Nello stesso tempo, alcuni neutrofili hanno mostrato uno spostamento nucleare a sinistra e il numero dei neutrofili band  è aumentato significativamente. Quando il valore NEU-X raggiunge 504,5, la quantità di granulazioni tossiche risulta decisamente aumentata e il colore del citoplasma era più scuro rispetto agli altri livelli. E’ stata evidenziata una correlazione positiva tra il valore NEU-X e il numero di granulazioni tossiche. In altre parole, NEU-X potrebbe riflettere il numero e la densità delle granulazioni tossiche nel citoplasma dei neutrofili.

Conclusioni

I risultati di questo studio hanno mostrato che i neutrofili e parametri dei monociti NEU-X, NEU-Y, MON-X e MON-Y erano significativamente aumentati nel gruppo sepsi. C’erano differenze significative tra il controllo gruppo e gruppo di infezione batterica. Ciò  suggerisce l’utilizzo di NEU-X, NEU-Y, MON-X e MON-Y per diagnosi di sepsi con la possibilità di distinguere la sepsi da una infezione batterica. Inoltre, l’analisi della curva ROC ha mostrato che quando NEU-Y è stato utilizzato nella diagnosi di sepsi, l’AUC di 0,877 era superiore a quello del CRP (0,790), e la sensibilità e la specificità erano dell’87,3% e del 72,1%. Questo indica che NEU-Y ha un buon valore predittivo di screening se utilizzato nella diagnosi della sepsi e la sua prestazione diagnostica è migliore di quella della CRP.