Le interazioni intermolecolari dominano il comportamento della trasduzione del segnale in vari processi cellulari fisiologici e patologici, ma la valutazione di queste interazioni comporta un impegno significativo. Questo studio riporta un metodo single-molecule force spectroscopic che consente la delineazione funzionale di due siti di interazione (≈35 pN e ≈90 pN) tra gli effettori di segnale Ras e BRaf nel percorso canonico della mitogen-activated protein kinase (MAPK). Questa analisi rivela le mutazioni su BRaf a livello Q257 e A246, due siti frequentemente legati alla sindrome cardio-faciocutanea, che determinano alterazioni di ≈10-30 pN della forza di legame intermolecolare Ras – BRaf. La dimensione delle variazioni della forza di legame di Ras – BRaf è correlata con la dimensione delle alterazioni dell’affinità della proteina e della trasmissione sinaptica mediata dal recettore per il glutammato-sensibile all’α-ammino-3-idrossi-5-metil-4-isossazolepropionico (AMPA) – nei neuroni che esprimono mutanti BRaf di sostituzione e permette di predire l’estensione delle alterazioni dell’apprendimento negli animali che esprimono mutanti BRaf di sostituzione. Questi risultati dimostrano come la single-molecule force spectroscopy costituisca una piattaforma efficace per valutare l’interazione a livello di piconewton delle molecole di segnalazione e prevedere l’esito del comportamento della trasduzione del segnale.
20 settembre 2017
Una nuova tecnica per predire l’evoluzione di malattie sulla base delle alterazioni genetiche
Piconewton-Scale Analysis of Ras-BRaf Signal Transduction with Single-Molecule Force Spectroscopy
Chae-Seok Lim, Cheng Wen, Yanghui Sheng, et al.
Small 15 August 2017
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/smll.201701972/abstract;jsessionid=779DD39C46F3821CB58EEC70A4F28B6A.f04t02